高通量蛋白質穩定性分析可用于評估大量蛋白質在不同條件下的穩定性，其目的在于篩選出穩定性高、適合進一步研究和應用的蛋白質候選物，廣泛應用于藥物篩選、成藥性分析、生物技術藥物研發等領域。
差示掃描熒光法(DSF)：
原理：通過檢測當溫度升高或變性劑存在時，蛋白質內源熒光的發射光譜變化來確定蛋白質的變性轉變溫度(熱轉變溫度Tm值或化學變性Cm值)。
特點：無需對待測樣品進行標記或使用熒光探針，即可快速測量整塊樣品微孔板，提供高通量數據。
其他方法：
生化方法：如圓二色譜(CD)等，用于研究蛋白質的二級結構。
差示掃描量熱法(DSC)：雖然常被視為蛋白質穩定性分析的重要解決方案，但由于對大量樣品的快速分析需求受限，其在藥物篩選和早期開發中的應用受到一定限制。
高通量蛋白質穩定性分析系統的技術特點：
高通量：能夠在短時間內獲取盡可能多的信息。
低成本：使用標準的384孔板，無需特殊耗材以及毛細管，一次成本較低。
寬溫度掃描范圍：具有10℃~105℃的寬溫度掃描范圍，能夠覆蓋多個蛋白質的結構域。
高靈敏度：采用高靈敏度的CMOS檢測器，能夠準確檢測熒光變化。
樣品用量少：樣品用量僅需微量，濃度范圍廣泛，適用于多個階段的穩定性分析。
高通量蛋白質穩定性分析系統的應用：
加速突變體的篩選：通過高通量分析，可以快速篩選出穩定性提高或降低的突變體。
配方和預配方的篩選和優化：在藥物研發中，用于篩選和優化藥物的配方。
蛋白結晶條件篩選：幫助確定適合蛋白質結晶的條件。
批間一致性評估：確保不同批次生產的蛋白質具有一致的穩定性。
生物相似性評估：在生物技術藥物研發中，用于評估不同來源或制備方法的蛋白質之間的相似性。
加速應力和強制降解研究：研究蛋白質在特定條件下的降解情況，為藥物儲存和運輸條件的確定提供依據。
關注微信